Calcolo della Zona di Inibizione: Guida al Test di Sensibilità agli Antibiotici
Introduzione al Test di Kirby-Bauer
Il calcolo della zona di inibizione è un passaggio fondamentale nel test di Kirby-Bauer, utilizzato per analizzare la sensibilità dei batteri agli antibiotici. Sviluppato per la prima volta negli anni '60, questo test è ancora oggi impiegato nei laboratori clinici per confrontare l'efficacia di diversi antibiotici. Anche gli studenti di scienze che praticano le loro capacità di ricerca possono eseguire questo test relativamente semplice.
Materiale Necessario
- Dischi di agar preparati
- Foglio di carta nero
- Righello in millimetri
Procedura Passo per Passo
- Raccogliere i campioni preparati. Nel test, un ceppo batterico viene distribuito su una piastra di agar con piccoli dischi circolari di carta filtrante imbevuta di antibiotico premuti sulla superficie. Il tutto viene incubato durante la notte, permettendo all'antibiotico di diffondersi nell'agar.
- Posizionare la piastra di agar su un foglio di carta nero. Questo rende la zona di inibizione più visibile.
- Identificare la zona di inibizione attorno a un disco di carta filtrante. La zona sarà un'area circolare intorno al disco dove non c'è crescita batterica.
- Misurare il diametro della zona di inibizione. Posizionare un righello sotto la piastra e misurare fino al millimetro più vicino. Se la crescita batterica non è stata inibita attorno a quel disco, la zona di inibizione corrisponde al diametro del disco stesso.
- Ripetere i passaggi 3 e 4 per ogni disco di carta filtrante.
- Etichettare i dischi e i rispettivi antibiotici. Quelli con le zone di inibizione più piccole come "Resistenti", quelli con le zone più grandi come "Sensibili" e quelli intermedi come "Intermedi".
Interpretazione dei Risultati
Le dimensioni delle zone di inibizione vengono confrontate con tabelle standardizzate (come quelle del CLSI - Clinical and Laboratory Standards Institute) per determinare se un batterio è sensibile, intermedio o resistente a un determinato antibiotico. Questo permette ai medici di scegliere la terapia antibiotica più appropriata.