Diluizioni Seriali in Microbiologia: Guida Completa
diluizioni seriali sono usate in laboratori biologici e chimici principalmente per scopi sperimentali. Spesso fatte in modo logaritmico o per fattori di 10. Più spesso batteri, cellule o soluti sono diluiti come controlli negli esperimenti. Le diluizioni servono come controllo accurato in esperimenti dose-risposta poiché tutti i campioni provengono dallo stesso lotto. Inoltre, possono essere necessarie per ridurre il numero di particelle in un campione per uso in apparecchiature automatizzate. Le diluizioni seriali si completano prendendo un piccolo volume dal campione originale e ponendolo in una nuova provetta, riportandolo al volume originale con la soluzione diluente. Formula generale: concentrazione originale / fattore di diluizione = nuova concentrazione. Esempio: diluizione seriale di 10 mL di 2,5×10⁷ cellule/mL a 25 cellule/mL per diluizione di 100.
Materiale necessario
- Occhiali protettivi
- Guanti
- 10 mL di 2,5×10⁷ cellule/mL
- Tre provette da 100 mL
- Matita cerosa
- Pipetta 1 mL
- Pipetta 100 mL
Procedura
- Indossate occhiali protettivi e guanti prima di manipolare sostanze.
- Etichettate le tre provette con matita cerosa: 2,5×10⁵, 2,5×10³, 25 cellule/mL.
- Usate la formula: concentrazione originale / fattore di diluizione = nuova concentrazione per la prima diluizione. Concentrazione originale 2,5×10⁷, fattore 100 → 2,5×10⁵ cellule/mL.
- Prima diluizione (fattore 100): pipettate 1 mL della soluzione originale nella provetta "2,5×10⁵ cellule/mL". Aggiungete 99 mL d'acqua per completare la diluizione a 2,5×10⁵ cellule/mL.
- Seconda diluizione (fattore 100): pipettate 1 mL dalla provetta 2,5×10⁵ in quella "2,5×10³ cellule/mL". Aggiungete 99 mL d'acqua per diluizione a 2,5×10³ cellule/mL.
- Terza diluizione (fattore 100): pipettate 1 mL dalla provetta 2,5×10³ in quella "25 cellule/mL". Aggiungete 99 mL d'acqua per diluizione finale a 25 cellule/mL.