Test Sensibilità Antimicrobica: Principi, Metodi e Applicazione Clinica

Il test di sensibilità antimicrobica (AST) determina se un patogeno è inibito o ucciso da un antibiotico a concentrazioni clinicamente raggiungibili, guidando terapia mirata e stewardship.

Metriche Chiave

• MIC (Concentrazione Minima Inibente): Più bassa concentrazione che previene crescita visibile (µg/mL).
• MBC (Concentrazione Minima Battericida): Più bassa concentrazione che uccide ≥99,9% inoculo.
• Breakpoints (CLSI/EUCAST): Criteri interpretativi (Sensibile/Intermedio/Resistente) collegando MIC a esito clinico basato su PK/PD, dosaggio, meccanismi resistenza.

Metodi di Test

Metodo	Principio	Caso Uso Primario
Microdiluizione Brodo (BMD)	Diluizioni seriali antibiotico in pozzetti microtiter + inoculo	Standard riferimento; MIC quantitativo
Diluizione Agar	Antibiotico incorporato in piastre agar	Riferimento per anaerobi, organismi fastidiosi
Diffusione Disco (Kirby-Bauer)	Zona inibizione intorno disco impregnato antibiotico	Clinica routinaria; qualitativo S/I/R
Etest (Diffusione Gradiente)	Striscia gradiente preformata su agar	MIC per organismi specifici; comodo
Sistemi Automatizzati (VITEK, Phoenix, MicroScan)	BMD + rilevazione crescita fluorometrica/colorimetrica	Laboratori clinici high-throughput
Molecolare (PCR, WGS)	Rilevazione gene/mutazione resistenza	Screening rapido; complementa test fenotipico

Fattori Influenzanti

• Dimensione inoculo, mezzo (Mueller-Hinton cation-adjusted), condizioni incubazione (35°C, 16–20h, 5% CO₂ per alcuni organismi).
• Fattori organismo-specifici: resistenza intrinseca (es. Pseudomonas AmpC), resistenza acquisita (plasmidi, mutazioni).
• Fattori ospite: legame proteine, penetrazione tessuti, status immunitario.

Impatto Clinico

• De-escalation da terapia empirica a mirata (riduce resistenza, tossicità, costo).
• Controllo infezioni (rilevazione MDR).
• Epidemiologia (sorveglianza resistenza).

L'AST rimane pietra angolare dei programmi stewardship antimicrobici.