Esperimento Digestione Amido: Procedura, Materiali e Osservazioni con Amilasi Salivare
Obiettivo
Osservare e studiare la digestione enzimatica dell'amido usando amilasi salivare, tracciando degradazione amido e formazione glucosio nel tempo.
Materiali
- 2 provette
- Bagno termostatico o blocco riscaldante a 37°C (temperatura corporea)
- Soluzione iodio diluita
- Soluzione Benedict
- Soluzione amido 1%
- Enzima amilasi salivare (liquido)
- Strisce indicatrici pH
- Cronometro o timer
- Contagocce
- Occhiali sicurezza
Procedura
- Etichettare provette: Marcarne una "Controllo" e l'altra "Enzima".
- Setup controllo: Aggiungere 5 mL soluzione amido + 5 mL acqua a provetta Controllo; mescolare delicatamente.
- Setup enzima: Aggiungere 5 mL soluzione amido + 5 mL amilasi salivare a provetta Enzima; mescolare delicatamente.
- Incubazione: Posizionare entrambe provette in bagno 37°C, assicurando immersione.
- Intervalli temporali: Testare a 0, 5, 10, 15 minuti.
- Test amido (iodio): A ogni intervallo, aggiungere 2–3 gocce iodio a ogni provetta. Blu-nero indica presenza amido; colore che svanisce mostra digestione.
- Test glucosio (Benedict): Aggiungere 5 gocce soluzione Benedict, scaldare in bagno bollente 2–3 minuti. Cambio colore (verde→giallo→arancio→rosso) indica glucosio crescente.
- Monitoraggio pH: Usare strisce pH a ogni intervallo.
- Registrare osservazioni: Annotare cambiamenti colore e pH per entrambe provette a ogni punto temporale.
- Ripetere: Eseguire esperimento più volte per consistenza.
Risultati Attesi
- Controllo: Iodo resta blu-nero (amido invariato); Benedict resta blu (nessun glucosio); pH stabile.
- Enzima: Colore iodio svanisce nel tempo (amido digerito); Benedict cambia colore (glucosio prodotto); pH può calare leggermente per sottoprodotti acidi.
Conclusione
Questo esperimento dimostra amilasi salivare scomporre amido in glucosio. Test iodio e Benedict tracciano visivamente scomparsa substrato e formazione prodotto, mentre monitoraggio pH rivela cambiamenti chimici associati. Illustra specificità enzima-substrato e ruolo enzimi digestione carboidrati.