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Diagnosi della Dengue: test di laboratorio e sintomi

Contesto

Dengue = arbovirosi più diffusa (≥100 mln infezioni/anno). Spettro: febbre lieve → shock letale. Diagnosi: clinica + laboratorio. Paesi in via sviluppo: spesso solo clinica. Paesi sviluppati: test in centri specializzati.

Metodi di conferma diagnostica

1. Sierologia (più usata)

  • MAC-ELISA (IgM capture): test di scelta per conferma rapida (giorno 3-5+). Sensibilità ~90%, specificità ~98%. Ripetere a 10-14 gg se negativo precoce. Campioni acuto + convalescente analizzati insieme con HI o EIA per conferma definitiva.
  • HI (emagglutinazione-inibizione): test classico. Aumento 4x titolo tra campione acuto e convalescente = infezione acuta. Cross-reattività flavivirus (Zika, febbre gialla, encefalite giapponese, West Nile).
  • IgG/IgM ELISA/IFA: IgG sensibilità 99%, specificità 96% vs HI. IgM per infezione recente; IgG per passata. Titolo IgG alto in infezione secondaria (ADE).
  • Fissazione complemento / neutralizzazione: tecnicamente complessi, solo laboratori di riferimento.

2. Rilevazione antigene/genoma virale (fase acuta, giorni 1-5)

  • NS1 antigenemia (ELISA/rapido): specifico dengue, sensibile 80-90% primaria, 60-80% secondaria. Disponibile fuori USA (alcuni test FDA-approved).
  • RT-PCR / real-time PCR: rileva RNA virale, identifica sierotipo. Gold standard fase acuta. Richiede laboratorio molecolare.
  • Isolamento virale (coltura cellule C6/36, AP61, Vero): conferma definitiva, ma lento (giorni-settimane), solo ricerca/sorveglianza.

3. Algoritmo diagnostico pratico (OMS/CDC)

  1. Giorno 1-5: NS1 + PCR (se disponibile) + IgM/IgG. NS1+ = conferma. PCR+ = conferma + sierotipo.
  2. Giorno 5+: IgM (positivo = infezione recente). IgG alto + IgM basso/negativo = infezione secondaria/passata.
  3. Campioni paired (acuto + convalescenza 10-14 gg) per sierologia definitiva.

Esami di supporto

  • Emocromo: leucopenia, trombocitopenia, emoconcentrazione (Hct ↑).
  • Coagulazione: PT/aPTT, fibrinogeno, D-dimero (se sanguinamento/DIC).
  • Funzionalità epatica: AST, ALT, GGT ↑.
  • Albuminemia ↓ (permeabilità vascolare).
  • Gas ematico, lattato (se shock).

Limitazioni

  • Cross-reattività sierologica flavivirus (vaccino febbre gialla, Zika, JE, WNV).
  • NS1 meno sensibile in infezioni secondarie.
  • PCR richiede catena del freddo, expertise.
  • Tempistica: test giusto al momento giusto.

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