Procedura di Tipizzazione del Sangue: Determinazione ABO/Rh Passo per Passo

La tipizzazione del sangue determina il gruppo ABO e lo stato Rh(D) per la compatibilità trasfusionale. Eseguita in centri trasfusionali da tecnologi formati con metodi standardizzati.

Prelievo del Campione

• Puntura venosa in tubi EDTA (tappo viola) o coagulato (tappo rosso).
• Verifica identità del paziente al letto usando braccialetto e due identificativi.

Tipizzazione Diretta (Cellulare)

1. Preparare una sospensione di globuli rossi al 2-5% in soluzione salina.
2. Su vetrino, card o pozzetto: Aggiungere GR del paziente più Anti-A, Anti-B e Anti-D di reagente (miscela IgM/IgG).
3. Incubare e centrifugare secondo istruzioni del produttore (metodo a tubetti: centrifuga 15-30 sec; metodo a gel: 5-10 min).
4. Leggere i risultati: L'agglutinazione indica la presenza dell'antigene.
   • Anti-A +, Anti-B – → Gruppo A
   • Anti-A –, Anti-B + → Gruppo B
   • Anti-A +, Anti-B + → Gruppo AB
   • Anti-A –, Anti-B – → Gruppo O
5. Anti-D + → Rh positivo; Anti-D – → Rh negativo.

Tipizzazione Inversa (Sierica) (Conferma, >4 mesi di età)

1. Testare siero o plasma del paziente contro globuli rossi di reagente A₁ e B.
2. Reazioni attese: Siero gruppo A agglutina cellule B; Siero gruppo B agglutina cellule A₁; Siero gruppo O agglutina entrambe; Siero gruppo AB agglutina nessuna.
3. Discrepanze richiedono indagine (sottogruppi, autoanticorpi a freddo, trasfusioni recenti, neoplasie).

Interpretazione e Referto

• Tipizzazione diretta e inversa devono concordare.
• Formato referto: "A Rh positivo", "O Rh negativo", ecc.
• Test per D debole (Du) se Anti-D negativo ma antigene D sospetto; tipizzazione molecolare per D debole tipi 1,2,3 → trattare come D+; altri tipi → trattare come D–.

Test Aggiuntivi per Trasfusione

• Screening anticorpi: Siero del paziente testato contro pannello di GR di reagente per rilevare alloanticorpi inaspettati.
• Crossmatch: Elettronico (se nessun anticorpo e ABO/Rh validi) o sierologico (siero paziente + GR donatore).
• Fenotipizzazione estesa: Per pazienti trasfusi cronicamente (anemia falciforme, talassemia) — K, Fy, Jk, S, s, ecc.

Assicurazione Qualità

• Controllo qualità giornaliero di reagenti e apparecchiature.
• Test di competenza (CAP, AABB).
• Analizzatori automatizzati (es. Ortho Vision, Immucor Galileo) standardizzano la lettura dei risultati.

Una tipizzazione accurata è la base di una trasfusione sicura — errori possono causare reazioni trasfusionali emolitiche acute (AHTR), potenzialmente fatali.