Strisci Diretti Colorati: Vantaggi e Identificazione Microrganismi

L'identificazione dei microrganismi è cruciale per il trattamento delle malattie. L'esame microscopico di uno striscio colorato è solitamente il primo passo per rilevare e identificare batteri patogeni. La procedura non dà identificazione definitiva, ma fornisce indizi su dimensioni, forma, struttura. Le colorazioni sono dirette o indirette. La colorazione diretta può essere semplice o differenziale. Nonostante limiti, ha molti vantaggi.

Preparazione dello Striscio

• Primo passo: preparare lo striscio. Cellule da coltura o campione stese in sottile strato su vetrino, essiccate e fissate con calore o fissativo chimico. Il fissaggio attacca i batteri al vetrino impedendo che vengano lavati via durante la colorazione. Lo striscio deve essere abbastanza sottile da osservare singole cellule e ben fissato per resistere a lavaggi ripetuti.

Coloranti

• Per l'alto contenuto d'acqua, i microrganismi sono quasi incolori. La colorazione li evidenzia rivelando caratteristiche. I coloranti sono sali di ioni carichi. In acqua, il sale dissocia in cationi (+) e anioni (-). Nei coloranti, o i cationi o gli anioni sono colorati. Coloranti basici: cationi colorati, anioni incolori (es. blu di metilene, fucsina basica, violetto cristallo). Coloranti acidi: anioni colorati, cationi incolori (es. eosina, rosso Congo, nigrosina).

Principio

• I batteri hanno carica netta leggermente negativa. Attraggono e legano coloranti basici (cationi +). Poiché i batteri trattengono il colorante, è una colorazione diretta. Può essere semplice (un colorante per dimensioni, forma, disposizione) o differenziale (es. Gram: due coloranti basici di colore diverso per distinguere tipi batterici oltre alle caratteristiche fisiche). La colorazione indiretta (negativa) usa coloranti acidi: i batteri respingono il colorante e restano incolori su sfondo colorato.

Vantaggi

• La colorazione diretta è la tecnica più usata per visualizzare batteri. Economica, semplice, rapida. Fornisce risultati in giornata, vantaggio potenzialmente salvavita per diagnosi e trattamento di infezioni gravi (es. meningite batterica). Gli strisci colorati direttamente sono preparati permanenti, riesaminabili. Poiché la colorazione uccide i batteri, riduce il rischio di infezione nella manipolazione.