Conservazione campioni fecali: tempistiche di vitalità per metodo di preservazione
L'integrità del campione fecale è altamente sensibile a tempo e temperatura. Raccolta, trasporto e conservazione corretti sono critici per risultati accurati in microbiologia, parassitologia e test molecolari.
Tempi massimi di conservazione per condizione di stoccaggio
| Condizione | Temperatura | Finestra vitalità | Test adatti | Test non adatti |
|---|
| Temperatura ambiente | 20–25°C | ≤ 2 ore (ideale < 1 h) | Limitati: tossina C. difficile (alcuni kit), antigene rapido | Coltura, O&P, PCR, grassi fecali, elastasi, calprotectina |
| Refrigerato | 2–8°C | 24–72 ore (ottimale ≤ 24h) | Coltura (batterica), O&P, tossina/PCR C. diff, sangue occulto, leucociti fecali, calprotectina, elastasi | Alcuni virus, organismi fastidiosi (vitalità Campylobacter cala) |
| Congelato | ≤ -20°C (preferibile -70/-80°C) | Mesi/anni | PCR/molecolare, antigene virale, microbioma, metaboloma, calprotectina (stabile) | Coltura (organismi muoiono), O&P (morfologia distrutta), sangue occulto (emoglobina degrada) |
| Conservanti (Cary-Blair, ParaPak, SAF, Formalina 10%, PVA) | Temp. ambiente (per kit) | Giorni/settimane (specifico kit) | O&P (Cary-Blair, SAF, PVA), Coltura (Cary-Blair), PCR (maggior parte) | Formalina: no coltura, no antigene; PVA: no coltura |
Requisiti test-specifici
- Coltura batterica (Salmonella, Shigella, Campylobacter, E. coli O157, Yersinia): mezzo trasporto Cary-Blair; processare ≤ 48h refrigerato. Campylobacter: ≤ 24h, microaerofilo.
- Ova e Parassiti (O&P): SAF (acetato sodio-acido acetico-formalina) o PVA (alcol polivinilico) – preserva morfologia settimane. Non conservato: ≤ 1 h per trofozoiti.
- C. difficile: Non conservato refrigerato ≤ 24h (tossina EIA); PCR stabile congelato settimane.
- PCR virale (Norovirus, Rotavirus, Adenovirus): Congelato -70°C preferito; refrigerato ≤ 72h.
- Grassi fecali (quantitativo 72h): Refrigerato per tutto il periodo raccolta; nessun conservante.
- Calprotectina / Elastasi: Refrigerato ≤ 72h; congelato stabile mesi.
- Microbioma / Metagenomica: Congelato -80°C immediato (OMNIgene•GUT, alternative RNAlater a temp. ambiente).
Best practice raccolta
- Usare contenitore pulito, asciutto, a bocca larga (nessuna contaminazione urinaria).
- Riempire 1/3–1/2 per feci solide; liquido – contenitore pieno.
- Etichettare: ID paziente, data/ora, test richiesti.
- Trasportare in laboratorio ASAP; se ritardo, refrigerare (non congelare se non istruito).
- Per O&P: consegnare 3 campioni in giorni alterni (aumenta sensibilità 90%+).
Errori comuni che invalidano i risultati
- Contaminazione urinaria (diluisce, altera pH, inibisce coltura).
- Ritardo eccessivo a temp. ambiente → sovracrescita coliformi, morte patogeni.
- Congelamento campione non conservato per coltura/O&P.
- Conservante sbagliato per test richiesto.
- Volume insufficiente.
Regola d'oro: Fresco è meglio. Processare entro 2 ore o usare mezzo di trasporto appropriato. Comunicare con il laboratorio per requisiti specifici.
Riferimento: ASM/CLSI M40-A2, CDC DPDx, CAP Microbiology Checklist. SOP specifiche del laboratorio prevalgono su linee guida generali.