Colorazione acido-resistente per tubercolosi: metodo Ziehl-Neelsen e interpretazione
I bacilli acido-resistenti (BAAR) ritengono fucsina basica dopo decolorazione acido-alcol per parete cellulare ricca acidi micolici — hallmark Mycobacterium tuberculosis complex.
Procedura Ziehl-Neelsen (ZN)
- Striscio espettorato su vetrino; asciugare aria, fissare calore.
- Coprire con fucsina basica; scaldare delicatamente (vapore) 5 min.
- Risciacquare; decolorare con 3% HCl in 95% etanolo fino a rosa.
- Controcolorare con blu metilene 30 sec.
- Risciacquare, asciugare, esaminare immersione olio 1000×.
Interpretazione
- BAAR positivo: Bastoncini rossi su sfondo blu. Riportare quantità (scala OMS/IUATLD: 1+ a 3+).
- Sensibilità: ~50-60% per TB coltura-positivo (serve 10⁴ bacilli/mL).
- Specificità: Alta per micobatteri; Nocardia parzialmente acido-resistente (debole).
Alternative moderne
- Microscopia fluorescente (auramina-rhodamina): Sensibilità superiore, screening più veloce.
- Xpert MTB/RIF Ultra (GeneXpert): NAAT automatizzato; rileva M. tb + resistenza rifampicina in 2 ore; OMS-raccomandato test iniziale.
- Coltura (LJ, MGIT): Gold standard; 2-6 settimane; permette DST.
Algoritmo diagnostico
TB presuntiva → Xpert Ultra → se positivo, trattare; se negativo ma alto sospetto → coltura + giudizio clinico. Striscio BAAR ancora usato dove NAAT non disponibile.