Salute e malattia
OptiPrep è il nome commerciale di una soluzione sterile di endotossina al 60% di iodixanolo, un composto sviluppato originariamente come mezzo di contrasto per raggi X. Le endotossine sono molecole strutturali dei batteri, riconosciute dal sistema immunitario. Il laboratorio norvegese Axis-Shield produce questa soluzione, ampiamente usata in ricerca biomedica: traffico di membrane cellulari, genetica di virus e batteri.
Preparazione a gradiente di OptiPrep per scopi generali usando cloruro di sodio come bilanciatore osmotico. I tecnici preparano una soluzione di lavoro al 50% di iodixanolo diluendo OptiPrep con diluente standard. Aggiungono 0,85% cloruro di sodio o 0,25 M saccarosio e Tris-cloridrato a pH 7,4. Secondo Axis-Shield, le macromolecole sono state tradizionalmente purificate in gradienti con alte concentrazioni di saccarosio, glicerolo, sali di metalli alcalini o pesanti. OptiPrep offre l'alternativa di isolarle in soluzioni meno concentrate.
HPV (papillomavirus umano) attacca mucose, causando verruche genitali e ulcere che possono evolvere in tumori. Il protocollo OptiPrep per lo studio del materiale genetico del virus include la preparazione a gradiente. I tecnici preparano una preparazione a gradiente OptiPrep al 46% mescolando: 70 ml OptiPrep, 10 ml tampone fosfato salino (PBS), 12,5 ml cloruro di sodio, 45 µl cloruro di calcio, 25 µl cloruro di magnesio, 210 µl cloruro di potassio. La preparazione va protetta dalla luce e conservata a temperatura ambiente fino a 2 mesi.
Le cellule dendritiche fanno parte del sistema immunitario dei mammiferi, presenti in tessuti vicini alla pelle e nel rivestimento interno di organi come stomaco e intestini. Il protocollo usa OptiPrep per isolarle. I tecnici mescolano OptiPrep in soluzione di cloruro di sodio all'8%, tampone Tricine a pH 7,4 e acido etilendiamminotetraacetico (EDTA). La preparazione a gradiente può essere conservata fino a 4°C (39,2°F) per un mese.
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