Calibrazione HPLC: Guida Completa per Risultati Accurati

L'HPLC è un test di cromatografia liquida ad alte prestazioni che forza solventi attraverso una colonna sotto alte pressioni fino a 400 atmosfere. L'alta pressione fa eseguire questo test cromatografico più velocemente di altri test con metodi di rilevamento per HPLC automatizzati e sensibili. Per eseguire l'HPLC, una serie di standard di calibrazione contenenti i composti specifici che stai testando devono essere preparati usando una curva di calibrazione.

Materiale Necessario

• Colonna HPLC
• Campioni
• Acqua HPLC
• Standard per campioni
• Matracci volumetrici
• Microsoft Word o Excel

Istruzioni

1. Prepara una serie di diluizioni per preparare standard di calibrazione contenenti i composti da analizzare. Fai gli standard variare da 20 microgrammi per millilitro a 100 microgrammi per millilitro usando matracci volumetrici. Usa acqua grado HPLC per le tue diluizioni. Se stai analizzando caffeina, per esempio, vuoi ottenere uno standard per caffeina e diluirlo per creare una curva standard.

2. Prepara il tuo campione che vuoi analizzare nell'HPLC. Per esempio, se vuoi analizzare caffeina, puoi scegliere tè o caffè.

3. Diluisci il campione con acqua grado HPLC in modo che sia nel range dei tuoi standard.

4. Inietta i campioni nella colonna HPLC. Segui le istruzioni specifiche fornite dal produttore per la tua particolare colonna.

5. Crea un grafico dei dati ottenuti per le tue soluzioni standard con area del picco versus concentrazione del campione.

6. Determina la concentrazione di ogni componente presente nel tuo campione dalla curva standard che hai creato.