Salute e malattia
La citofluorimetria (flow cytometry) è il processo di analisi e conteggio di cellule e particelle usando la teoria della dispersione della luce e dell'eccitazione luminosa. Le cellule sono forzate attraverso una guaina una alla volta e passano attraverso il fascio di un laser. Il laser eccita le sostanze chimiche all'interno delle cellule. Diversi tipi di cellule emettono diversi tipi di luce. Rilevatori ottici o lenti captano e misurano la luce, trasformandola in un flusso di dati. Analizzando i dati, i tecnici possono determinare la distribuzione delle cellule e aiutare medici e ricercatori a prendere decisioni riguardo al trattamento.
Imposta i parametri del citofluorimetro. Ogni citofluorimetro ha un componente computer che accetta la luce emessa dalle cellule e converte la quantità e qualità della luce in dati accessibili. Poiché ci sono diversi tipi di cellule, viene creata una grande quantità di dati. Impostare i parametri dei dati necessari rallenta il flusso di informazioni a un livello gestibile. Alcune opzioni includono impostare il livello di tensione, regolare i parametri dell'impulso laser o impostare la soglia di luce.
Scegli i filtri su ogni lente ottica. I filtri che tagliano banda specifica per ogni lente permettono al citofluorimetro di riconoscere le diverse proprietà chimiche di ogni cellula. Permette anche al citofluorimetro di riconoscere se la luce è riflessa dritto davanti, come forward scatter (FS) o se è riflessa a un angolo di 90 gradi in side scatter (SS).
Scegli acquisizione logaritmica o lineare. L'acquisizione lineare sono i dati grezzi generati dal citofluorimetro. Mostra il tipo di cellula, o la composizione chimica delle cellule che fluiscono attraverso il fascio laser. La funzione logaritmica va un passo oltre. Usa una funzione matematica per proiettare cellule aggiuntive che potrebbero non essere rilevabili dal citofluorimetro. Per esempio, le cellule possono mostrare un composto chimico che è un sottoprodotto di un'infezione virale. Anche se il virus può essere troppo piccolo per essere rilevato dal flusso di luce, la funzione logaritmica ipotizzerà la presenza del virus basandosi sulla composizione chimica delle cellule.
Seleziona istogrammi a uno o due parametri. Questi sono tipi di grafici usati per mostrare i dati raccolti dal citofluorimetro. Un istogramma a un parametro è appropriato se i dati sono tutti tracciati su un asse "positivo", significando che tutta la luce è riflessa e misurata. Un modo semplice per pensarci è immaginare un grafico a barre, con livelli a sinistra e in basso del frame. L'informazione è tracciata tra questi due parametri. Ma per quelle cellule che assorbono quantità diverse di luce, si usa un istogramma a due parametri. Questo permette ai dati di essere tracciati su assi sia positivi che negativi.
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