Ottenere Campioni Icterici per Validazione Test Laboratorio
Campioni itterici (bilirubina elevata) sono essenziali per validare interferenza saggi in laboratori clinici. Esistono tre approcci primari, ciascuno con compromessi.
Metodi per Ottenere Campioni Icterici
- Derivati da pazienti: Raccogliere siero/plasma da pazienti itterici (bilirubina totale >3–5 mg/dL). Richiede supervisione etica: consenso, approvazione IRB, de-identificazione.
- Campioni spiked: Aggiungere bilirubina purificata (non coniugata ± coniugata) a siero pooled normale. Mima rapporti fisiologici. Deve verificare stabilità su periodo test.
- Controlli sintetici/commutabili: Materiali riferimento itterici commerciali (es. NIST, Bio-Rad) con frazioni bilirubina caratterizzate. Migliori per sottomissioni regolatorie.
Protocollo Validazione
- Test analita su campioni itterici vs non-itterici (n≥20 per livello).
- Valutare bias: % differenza vs metodo riferimento.
- Criteri accettazione: Tipicamente ≤10% bias o per linee guida CLSI EP07/EP14.
- Documentare soglia interferenza: concentrazione bilirubina dove bias supera errore ammissibile.
Per sottomissioni regolatorie, usare materiali matrix-matched, commutabili. Campioni spiked potrebbero non replicare pienamente effetti legame proteine bilirubina nativa.