Visualizzare batteriofagi: microscopia e tecniche display

I batteriofagi (fagi) sono 20-200 nm — sotto risoluzione microscopia ottica. Visualizzazione richiede:

1. Microscopia Elettronica (EM)

• Trasmissione EM (TEM): Struttura interna, simmetria capside, morfologia coda. Gold standard.
• Scansione EM (SEM): Topologia superficie 3D.
• Cryo-EM: Risoluzione quasi-atomica senza colorazione; Nobel 2017.

2. Potenziamenti microscopia ottica

• Fluorescenza: Fago etichettato con coloranti/proteine fluorescenti (es. GFP-fuso capside). Live imaging possibile.
• Campo scuro / Contrasto di fase: Aumentano contrasto particelle non etichettate; risoluzione limitata.

3. Phage Display

• Libreria peptide/proteina fusa a proteina capside (pIII/pVIII) → legame fenotipo-genotipo.
• Usato per: Mapping epitopi, scoperta ligandi, ingegneria anticorpi, evoluzione diretta.

4. Colorazione negativa (Prep TEM)

• Acetato uranile / acido fosfotungstico → metallo pesante circonda fago → alto contrasto.
• Rapida, routine per controllo morfologia.

Scelta metodo dipende da domanda: struttura (cryo-EM), dinamica (fluorescenza), legame (phage display).