Salute e malattia
La colorazione di Gram, sviluppata da un microbiologo olandese nel 1884, è un test medico usato per differenziare tra due diverse condizioni polmonari. Il test esamina le cellule nei polmoni e determina quale tipo di batterio è presente basandosi sulle reazioni a certi componenti iniettati nel tessuto.
Il primo componente aggiunto a un laboratorio di colorazione di Gram è la colorazione primaria. Questa colorazione è tipicamente qualche tipo di colorante viola, come cristallo, metile o violetto di Genvezio. Lo scopo di questo colorante è cambiare il colore delle cellule batteriche. Tuttavia, questo componente non è usato da solo. Dopo che questo componente è aggiunto alle cellule, il secondo componente deve anche essere aggiunto prima di fare osservazioni preliminari. Senza il secondo componente, il colorante è meno propenso a colorare le cellule.
Nello stesso momento in cui il colorante è aggiunto alle cellule, il tecnico di laboratorio aggiunge anche iodio al mix. L'iodio lavora con il colorante viola per creare una presa più forte sulle cellule che trattengono il colore. In questa fase del test, tutte le cellule acquisiranno il colore viola-marrone del mix viola-iodio. A questo punto, c'è poca differenziazione tra un test positivo versus uno negativo.
Dopo che le cellule sono state colorate con la combinazione di colorante viola e iodio, alcol etilico, acetone o una combinazione dei due sono aggiunti per decolorare le cellule. Nelle cellule negative, la soluzione decolorante dissolve lo strato esterno grasso delle cellule. Poiché solo lo strato esterno di tutte le cellule assorbe il colorante, qualsiasi cellula negativa viene lavata libera del colore con questa soluzione. Tuttavia, le cellule Gram-positive mantengono il loro colore viola-marrone perché la soluzione disidrata le cellule, chiudendo i pori attraverso cui il colorante può sfuggire.
Laboratori diversi usano diversi tipi di controcolorazione come ultimo componente di un test di colorazione di Gram. Alcuni laboratori usano fucsina, mentre altri usano safranina. Tuttavia, la fucsina crea un colore più scuro, più facilmente visibile ed è spesso preferita. Lo scopo di questo secondo colorante è trasformare qualsiasi cellula negativa in un colore rosa invece del viola-marrone dalla combinazione di colorante viola e iodio. Questo aiuta il tecnico di laboratorio a vedere chiaramente le differenze tra i due tipi di cellule. Una volta che il tecnico di laboratorio somministra la controcolorazione, può differenziare tra le due cellule, così come vedere dimensioni e forma chiaramente.
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