Test batteri coliformi: metodi fermentazione a tubi multipli, filtrazione su membrana e substrato cromogeno

Feci uomo/animali a sangue caldo contengono coliformi (batteri naturali tratto digerente, aiutano digestione). Non causano malattie, ma loro presenza in acqua/suolo/vegetazione → indicatore altri batteri/virus/parassiti patogeni. Test presenza/quantità coliformi in campione acqua → determina potabilità.

Fermentazione a tubi multipli (Multiple-Tube Fermentation)

Coliformi in terreno coltura con lattosio → fermentano zucchero → producono gas. Tecnica: tubi brodo inoculati con diluizioni seriali campione (es. 1, 0,1, 0,01 ml), 5 tubi per diluizione, incubazione 35°C. Gas/crescita visibile entro 48h = positivo. Numero tubi pos/neg → stima coliformi (indice MPN - Most Probable Number).

Tecnica filtrazione su membrana (Membrane Filter Technique)

Per coliformi fecali: campione acqua passa attraverso filtro membrana pori 0,45 µm (trattiene batteri). Filtro su brodo specifico coliformi fecali, incubazione 44,5°C per 24h. Conteggio colonie → calcolo densità coliformi.

Test substrato cromogeno (Chromogenic Substrate Test)

Sostanze che cambiano colore per reazione chimica → rilevano proteine/enzimi specifici coliformi. Rileva presenza/assenza e stima numero (simile a tubi multipli). Terreni commerciali in tubi/pozzetti/contenitori 100 ml. Inoculo incubato 35°C per tempo specificato produttore → verifica cambiamento colore. Densità coliformi via tabella produttore.

Dimensione campione

Uso previsto acqua → volume campione:

• Acqua potabile: 100 ml
• Acqua fluviale: 5 ml
• Scarico acque piovane: 1 ml
• Fogne grezze: ≤1 ml