Salute e malattia
ELISA è l'acronimo di enzyme-linked immunoabsorbent assay (saggio immunoenzimatico), una procedura di test forense basata sull'elevata specificità degli anticorpi per un antigene specifico. I ricercatori usano anticorpi chimicamente modificati ancorati a un pozzetto del campione e antigeni marcati con colore per determinare la presenza e la concentrazione di una vasta gamma di composti, farmaci e patogeni. I campioni possono essere prelevati da sangue, urine, saliva e altre fonti.
Il primo passo per produrre un test ELISA è sviluppare un anticorpo contro il composto da testare. L'anticorpo viene poi purificato, modificato e immobilizzato su un pozzetto del campione. Il composto target riceve un'etichetta fluorescente. L'industria usa piastre rettangolari standard (127,8 mm × 85,5 mm) con "pozzetti campione" (da 6 a 96, modelli più recenti ne hanno centinaia) per eseguire più esperimenti contemporaneamente, compatibili con strumenti analitici di vari produttori.
Quando una soluzione contenente il composto target e il composto marcato con colore vengono messi nel pozzetto, competono per il legame sull'anticorpo immobilizzato. Più composto nativo è presente, meno composto marcato si lega. Il pozzetto viene lavato per rimuovere i composti non legati (nativi e colorati). Si valuta quanto composto marcato rimane, solitamente con uno spettrofotometro.
Meno colore significa una concentrazione più alta del composto nativo. I ricercatori allestiscono una "curva standard" in una serie di pozzetti con concentrazioni note del composto nativo. Il test ELISA viene eseguito su tutti i pozzetti e la differenza di colore attraverso lo standard permette di confrontare e determinare concentrazioni sconosciute nei campioni in esame.
I test ELISA rilevano una vasta gamma di sostanze: virus HIV, farmaci, veleni, altre sostanze chimiche. Offrono vantaggi di alto throughput per grandi numeri di campioni ed economicità quando se ne analizzano molti.
L'ELISA può anche rilevare anticorpi in una soluzione di test: in questo caso l'antigene (porzione del composto che lega l'anticorpo) è immobilizzato sul pozzetto, e gli anticorpi del test hanno un'etichetta colorata.
Settore sanitario (generale)