Salute e malattia
Siano esse espresse naturalmente o artificialmente, le proteine quasi mai si trovano da sole. L'analisi Western blot, o immunoblotting, è usata per isolare e analizzare una proteina di interesse da una miscela.
Il Western blotting consiste in tre fasi principali: elettroforesi, in cui la miscela proteica viene separata in bande localizzate basate su dimensioni e carica; trasferimento, in cui le proteine vengono spostate da un gel polimerico su un substrato di carta; e sviluppo, in cui la banda proteica di interesse viene etichettata e analizzata.
Il Western blotting è ampiamente usato nella ricerca biomedica. Poiché le proteine sono indicatori chiave della funzione cellulare, un Western blot può fornire informazioni sul metabolismo e il lignaggio cellulare. L'espressione di proteine ricombinanti può anche essere verificata e studiata usando un Western blot.
I Western blot sono laboriosi e richiedono tempo, e le loro applicazioni cliniche sono di conseguenza limitate. Tuttavia, sono importanti nella diagnosi di alcune malattie, tra cui la malattia di Lyme, l'HIV e le malattie da prioni come la malattia di Creutzfeldt-Jakob.
La prima dimostrazione di separazione proteica in un gel polimerico fu pubblicata nel 1977. Il rapido ed efficiente trasferimento della proteina su carta tramite elettroblotting — critico per l'accettazione del metodo — fu dimostrato nel 1979.
Il termine "Western blot" fa parte di un gioco di parole piuttosto elaborato degli scienziati. La procedura analoga per caratterizzare il DNA è chiamata Southern blot dal suo inventore, George Southern. La versione per l'RNA è universalmente nota come Northern blot e, forse inevitabilmente, l'immunoblotting proteico è Western blotting.
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