Metodi Separazione Sangue: Centrifugazione, Filtrazione, Frazionamento e Aferesi

Separare il sangue in componenti (plasma, siero, GR, GB, piastrine) è fondamentale per trasfusioni, diagnostica e ricerca.

1. Centrifugazione (Standard)

• Principio: Sedimentazione per forza centrifuga (g-force). Componenti più densi migrano verso l'esterno.
• Spin Standard (Hard Spin): 2200–2500g × 10–15 min.
  • Fondo: GR compattate (ematocrito ~80%).
  • Centro: Buffy coat (GB + piastrine) — <1% volume.
  • Superficie: Plasma (55% volume).
• Soft Spin (Prep PRP): 150–200g × 5–10 min.
  • Fondo: GR.
  • Superficie: Plasma Ricco Piastrine (PRP) — piastrine sospese in plasma.
• Double Spin (Terapia Componenti): Hard spin → separa plasma → secondo spin su plasma per concentrare piastrine (concentrato piastrinico) o rimuovere piastrine residue (plasma povero piastrine).
• Anticoagulante Richiesto: Citrato (CPD, ACD), eparina, EDTA — previene coagulazione durante spin.

2. Filtrazione

• Filtri Leucodeplezione: Rimuovono GB (<5×10⁶/unità) da sangue intero o componenti — previene reazioni febbrili, alloimmunizzazione HLA, trasmissione CMV. Standard per trasfusioni allogeniche.
• Filtrazione Plasma Povero Piastrine: Rimuove piastrine da plasma.
• Separazione Membrana Plasma (Plasmaferesi): Centrifugazione flusso continuo o membrana fibra cava — separa plasma da componenti cellulari in tempo reale (scambio plasma terapeutico).

3. Precipitazione (Frazionamento)

• Processo Cohn (Frazionamento Etanolo): Scala industriale. Etanolo freddo a pH/forza ionica/concentrazione proteica variabili precipita proteine specifiche (Albumina, IgG, Fattore VIII, ecc.). Base prodotti medicinali plasma-derivati.
• Scala Laboratorio: Precipitazione solfato ammonio, PEG per isolamento proteine.

4. Aferesi (Separazione Cellulare Automatizzata)

Centrifugazione flusso continuo (COBE, Spectra, Amicus) — raccoglie selettivamente un componente (piastrine, plasma, GR, cellule staminali, granulociti) e restituisce resto a donatore/paziente.

Prodotti Clinici

• GR (concentrate, leucodeplete, irradiate, lavate).
• Piastrine (aferesi donatore singolo vs pooled da sangue intero).
• Plasma (FFP, crioprecipitato-ridotto, crioprecipitato).
• Granulociti, Cellule staminali.