Salute e malattia
Il Tris-tricina è una polvere cristallina bianca usata nei laboratori di biologia molecolare come soluzione tampone. Questo composto organico è solubile in acqua, ha un basso livello di acidità ed è usato in procedure scientifiche, come l'elettroforesi su gel, per tamponare o bilanciare il pH delle soluzioni analizzate. I protocolli Tris-tricina includono SDS-PAGE in tampone Tris-tricina, gel Tris-tricina per elettroforesi e separazione di proteine a basso peso molecolare.
L'elettroforesi su gel di poliacrilammide con il detergente sodio dodecil solfato è una tecnica molto usata per la separazione su piccola scala di proteine, dice G. Brent Irvine, ricercatore alla Queen's University Belfast, in "Neuropeptide Protocols". I tecnici sciolgono acrilammide in acqua, mantenendo la soluzione a 4°C (39,2°F). Più tardi, aggiungono Tris-tricina, cloruro di idrogeno, mercaptoetanolo e SDS per comporre il gel. I biologi molecolari possono usare questo gel nell'apparato di elettroforesi, che è appositamente progettato per separare proteine.
Questo protocollo si riferisce alla preparazione del gel Tris-tricina per uso in esperimenti generali di elettroforesi, secondo l'Università di Washington. I tecnici mescolano soluzione di acrilammide, Tris-tricina, cloro, SDS e acqua bidistillata. Poi aggiungono glicerolo per separare solo il gel e rimuovono il gas creato nella soluzione sotto vuoto per fino a 15 minuti. Aggiungono persolfato di ammonio e tetrametiletilendiammina e mescolano per miscelare. Infine, aggiungono alcol isobutilico saturo d'acqua al gel.
Il Tris-tricina è un componente importante nella separazione di proteine a basso peso molecolare, dice Ian M. Rosenberg in "Protein Analysis and Purification: Benchtop Techniques". Per preparare la soluzione di elettroforesi Tris-tricina, i tecnici aggiungono TEMED, il colorante blu coomassie, i gel acrilammide e bisacrilammide, cloruro di idrogeno, glicerolo e SDS. Il processo di gelificazione è completato entro un'ora. I campioni proteici sono incubati a 40°C (104°F) per 30 minuti, prima dell'analisi elettroforetica.
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