Salute e malattia

Protocolli UFC: Misurazione Conteggi Microrganismi Vitali - Ricerca Biotecnologica

Unità formante colonia, o UFC, è una misura del numero di microrganismi. A differenza di altri metodi, come il microscopio diretto dove microrganismi morti e vivi sono considerati, i protocolli UFC permettono ai biologi di contare solo cellule vitali. Le unità di misura standard sono unità formanti colonia per millilitro per liquidi e unità formanti colonia per grammo per solidi. I protocolli UFC sono ampiamente usati nella ricerca biotecnologica.

Protocollo Assay UFC-MK per Trombocitopenia Acuta

Megacariocita, o MK, è un tipo di cellula del midollo osseo che produce piastrine. Questo protocollo è usato in studi sulla trombocitopenia, una condizione correlata a bassi numeri di piastrine. Prima del conteggio, i tecnici prepararono l'assay UFC-MK con cellule del sangue del cordone ombelicale umano, mezzo modificato di Dulbecco di Iscove, soluzione di collagene bovino, mezzo senza siero con proteine chiamate citochine, anticorpi anti-TNP, anti-GPIIb/IIIa e anti-mouse IgG, controcolorante blu Evans, tampone Tris/NaCl e albumina sierica bovina.

Protocollo Miscela Assay Colonia

I tecnici preparano questo assay con plasma umano, il chimico 2-mercaptoetanolo, mezzi condizionati da leucociti, l'ormone eritropoietina e mezzo Dulbecco modificato di Iscove, secondo Jeffrey W. Pollard in "Basic Cell Culture Protocols". Questa soluzione viene poi mescolata con i campioni cellulari da analizzare. Viene aggiunto metilcellulosa, e i campioni sono incubati in un'atmosfera umidificata con 5% di anidride carbonica per 14 giorni.

Migrazione di UFC in Cellule CD34

CD34, o cluster di molecole di differenziazione, sono presenti su certe cellule immunodifensive umane, agendo come fattore di adesione controllato sulle membrane cellulari. Le cellule contenenti questa proteina possono avere la capacità di migrare da un tessuto all'altro. Durante questo protocollo, i tecnici lavano campioni di cellule CD34 migrate per rimuovere proteine citochine. I campioni vengono poi centrifugati e risospesi in un mezzo contenente fattori di crescita. Le colonie vengono contate due settimane dopo.