Effetto citopatico (CPE) delle infezioni virali: tipi, esempi e uso diagnostico
Definizione
CPE (Cytopathic Effect): alterazioni microscopiche visibili in cellule infettate da virus: retrazione/rigonfiamento, degenerazione, sincizi (fusione cellule), corpi d'inclusione. Non tutti i virus inducono CPE. Se presenti, utili per identificazione/diagnosi virologica.
Metodo standard
Monostrato cellulare (es. Vero, HeLa, MDCK, cellule primarie) inoculato con campione clinico. Osservazione quotidiana al microscopio rovesciato (40–400×) per 7–14 giorni. CPE caratteristici → identificazione presuntiva → conferma PCR/sequenziamento/immunofluorescenza.
Principali tipi di CPE
Lisi (distruzione cellulare rapida → morte)
- Tipico enterovirus: echovirus, coxsackievirus (sintomi simil-influenzali + rash), poliovirus (eradicato vaccino in Occidente).
- Cellule si arrotondano, si staccano dal supporto, lasciano "buchi" nel monostrato.
Corpi d'inclusione (inclusion bodies)
- Masse compatte materiale virale in nucleo/citoplasma.
- Virus: Herpesviridae (HSV-1/2, VZV varicella-zoster, CMV), Reoviridae, Adenoviridae.
- Intranucleari (herpes, adenovirus) o citoplasmatiche (reovirus, rabies - corpi Negri).
Sincizi (fusione cellule multinucleate)
- Proteine fusogene virali (glicoproteine envelope) mediano fusione membrane plasmatiche.
- Virus: HIV (gp41), RSV (proteina F), morbillo (H/F), parotite (F/HN).
- Sincizi giganti = hallmark diagnostico.
Altri CPE
- Rounding/retrazione: molti virus (es. flavivirus)
- Vacuolizzazione citoplasmatica: coronavirus, picornavirus
- Emadsorbimento (eritrociti su cellule infette): virus parainfluenza, mumps, influenza (emagglutinina)
- Trasformazione cellulare: oncovirus (EBV, HPV, HTLV-1, KSHV) → foci cellulari trasformati
Valore diagnostico e limiti
- Rapido, economico, fenotipico.
- Sensibilità dipende da ceppo virale, linea cellulare, carica inoculo.
- Non quantitativo; non sostituisce PCR per carico virale/tipizzazione.
- Biosicurezza: BSL-2/3 per patogeni umani.