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Test di Ellman: Protocollo per Rilevare Esposizione a Pesticidi Organofosfati

Il test di Ellman monitora l'inibizione della colinesterasi ematica, enzima chiave nella degradazione dell'acetilcolina. Permette così di identificare l'esposizione a pesticidi organofosfati.

Vantaggi

  • Combinato con l'analisi dei metaboliti urinari, offre conferma rapida e semplice di esposizione.
  • Richiede una sola goccia di sangue.
  • Non serve ultracentrifuga; basta uno spettrofotometro (rilevazione onde luminose).

Metodo

  1. Ricoprire i pozzetti di una microplacca con acetiltiocolina (AChE).
  2. Aggiungere una micro-quantità di sangue per pozzetto.
  3. Incubare con reagente che lega la proteina bersaglio.
  4. Aggiungere reagente cromogeno che emette a 405 nm; misurare l'assorbanza.

Precauzioni

Il reagente cromogeno altera la lunghezza d'onda se esposto a temperature elevate: conservare in frigorifero.