Test di Ellman: Protocollo per Rilevare Esposizione a Pesticidi Organofosfati
Il test di Ellman monitora l'inibizione della colinesterasi ematica, enzima chiave nella degradazione dell'acetilcolina. Permette così di identificare l'esposizione a pesticidi organofosfati.
Vantaggi
- Combinato con l'analisi dei metaboliti urinari, offre conferma rapida e semplice di esposizione.
- Richiede una sola goccia di sangue.
- Non serve ultracentrifuga; basta uno spettrofotometro (rilevazione onde luminose).
Metodo
- Ricoprire i pozzetti di una microplacca con acetiltiocolina (AChE).
- Aggiungere una micro-quantità di sangue per pozzetto.
- Incubare con reagente che lega la proteina bersaglio.
- Aggiungere reagente cromogeno che emette a 405 nm; misurare l'assorbanza.
Precauzioni
Il reagente cromogeno altera la lunghezza d'onda se esposto a temperature elevate: conservare in frigorifero.