Cariotipo: Analisi Cromosomica in Genetica Medica
Cos'è il Cariotipo
Il cariotipo è la rappresentazione ordinata dei cromosomi di una cellula (numero, forma, dimensioni, bande). Permette visione d'insieme rapida di anomalie cromosomiche grosse (aneuploidie, traslocazioni, delezioni/inserzioni grandi, inversioni). Pilastro della genetica medica prenatale e postnatale.
Indicazioni Principali
- Sindrome di Down (Trisomia 21): Indicazione #1. Donne ≥35 anni: rischio significativamente più alto.
- Anomalie cromosomi sessuali note in genitori (XXX, XYY, XXY, X0) → rischio ricorrenza.
- Feto/bambino con dismorfismi suggestivi (faccie, mani, cuore, ritardo crescita).
- Aborti ricorrenti (indagine cariotipo genitori: traslocazioni bilanciate).
- Infertilità/azoospermia (cariotipo + microdelezioni Yq).
- Oncoematologia: cariotipo cellule midollari (traslocazioni diagnostiche: t(9;22) CML, t(15;17) APL, ecc.).
Come si Esegue
- Campionamento: Sangue periferico (linfociti T stimolati da fitoemoagglutinina), midollo osseo, liquido amniotico (amniocentesi), villi coriali (CVS), biopsia cutanea (fibroblasti).
- Coltura e arresto in metafase: Coltura 48-72h (sangue) / 7-10gg (amniociti/CVS). Colchicina blocca mitosi in metafase (cromosomi condensati, visibili).
- Preparazione vetrini: Trattamento ipotonico (gonfiore cellule), fissazione (metanolo/acetico), gocciolamento su vetrino, essiccazione.
- Banding (G-banding standard): Tripsina + Giemsa → bande chiare/scure (pattern caratteristico per cromosoma).
- Analisi: Microscopio / sistema cattura immagini digitale. Selezione 15-20 metafasi qualità. Cromosomi ritagliati (o software auto) e ordinati per coppie (1-22 + XY/XX) per dimensioni, centromero, pattern bande.
Cosa Rileva
- Numeriche: Trisomie (21, 18, 13), monosomie (X0 Turner), polisomie sessuali (XXY Klinefelter, XXX, XYY).
- Strutturali (se > 5-10 Mb): Traslocazioni bilanciate/sbilanciate, delezioni (es. 5p Cri-du-chat, 22q11 DiGeorge), duplicazioni, inversioni, cromosomi ad anello, cromosomi marker.
- Mosaicismi: Due o più linee cellulari diverse (es. 46,XX/47,XX,+21). Richiede conta ≥50 metafasi.
Limiti
- Risoluzione ~5-10 Mb (bande G). Non rileva microdelezioni/duplicazioni <5 Mb, mutazioni puntuali, UPD (uniparental disomy), metilazione anomala.
- Per questo: CMA (Chromosomal Microarray / aCGH/SNP-array) è oggi test di prima linea postnatale/prenatale (risoluzione ~50-100 kb). Cariotipo rimane essenziale per traslocazioni bilanciate, aneuploidie, mosaicismi basso livello, oncologia.
Prelievo Prenatale: Amniocentesi vs CVS
| Amniocentesi | Villi Coriali (CVS) |
|---|
| Epoca | 15-20 settimane | 10-13 settimane |
| Campione | Liquido amniotico (amniociti) | Tessuto trofoblastico (placenta) |
| Rischio aborto | ~0,1-0,3% | ~0,5-1% (leggermente superiore) |
| Vantaggio | Standard, conferma mosaicismi placentari | Risultato precoce |
| Limite | Più tardiva | Mosaicismi placentari confinati (falso +), serve conferma amniocentesi |
Effetti collaterali entrambi: sanguinamento lieve, crampi, perdita liquido amniotico. Discutere rischi/benefici con genetista/ostetrica.
Consulenza Genetica
Obbligatoria pre e post test. Il genetista/consulente genetico interpreta risultato, spiega significato, opzioni riproduttive, ricorrenza, aspetti psicosociali. National Society of Genetic Counselors (NSGC) per trovare professionisti.