Metodo Nelson-Somogyi: Capire il Test Metabolismo Glucosio Ematico
Il metodo Nelson-Somogyi è un classico saggio colorimetrico per determinazione glucosio ematico, basato su riduzione rame.
Principio
- Riduzione: Glucosio (zucchero riducente) riduce Cu²⁺ (cuprico) a Cu⁺ (cuproso) in reagente rame alcalino (reagente Nelson-Somogyi: solfato rame, carbonato sodio, tartrato sodio-potassio).
- Sviluppo Colore: Ossido cuproso reagisce con reagente arsenomolibdato (molibdato ammonio, acido solforico, arsenito sodio) formando complesso blu (blu molibdeno).
- Misurazione: Assorbanza letta a 540 nm (o 620–660 nm) correla con concentrazione glucosio.
Riassunto Procedura
- Precipitazione proteine (es. tungstato o idrossido zinco) per rimuovere proteine interferenti.
- Aggiungere reagente Nelson-Somogyi; scaldare bagno acqua bollente 15–20 min.
- Raffreddare; aggiungere reagente arsenomolibdato; incubare 10–15 min.
- Centrifugare/filtrare; misurare assorbanza vs standard glucosio.
Calcolo
Glucosio (mg/dL) = (Assorbanzacampione / Assorbanzastandard) × Concentrazione Standard
Metodo originale usava fattore 100 per volumi reagenti specifici; adattamenti moderni variano.
Range Riferimento (Glucosio Plasmatico Digiuno)
- Normale: 70–99 mg/dL (3,9–5,5 mmol/L)
- Prediabete: 100–125 mg/dL
- Diabete: ≥126 mg/dL
Contesto Clinico
- Storicamente importante; largamente sostituito da metodi enzimatici (glucosio ossidasi/esochinasi) più veloci, specifici, automatizzabili.
- Ancora usato in contesti risorse limitate o applicazioni ricerca specifiche.
- Misura zuccheri riducenti totali — non glucosio-specifico (interferenza altre sostanze riducenti).
Capire questo metodo dà insight basi biochimiche analisi glucosio.