Cromatografia ed Elettroforesi: Applicazioni in Tossicologia e Separazioni
Introduzione alla Cromatografia
La cromatografia è un processo mediante il quale una miscela liquida o gassosa viene separata nei suoi componenti grazie alla diversa distribuzione dei soluti mentre fluiscono intorno o attraverso una fase stazionaria liquida o solida. Questa tecnica è ampiamente utilizzata in tossicologia per separare e identificare droghe d'abuso.
Introduzione all'Elettroforesi
L'elettroforesi è il movimento di particelle sospese attraverso un mezzo (come carta o gel) sotto l'azione di una forza elettromotrice applicata a elettrodi a contatto con la sospensione. I microbiologi la usano spesso per separare e ordinare acidi nucleici (DNA e RNA) in base alle dimensioni.
Separazione delle Miscugli mediante Cromatografia
La cromatografia può separare qualsiasi miscela. Una miscela presenta due fasi:
- Fase stazionaria: fase solida dove viene posto il prodotto da separare.
- Fase mobile: gas che passa sopra il prodotto nella fase stazionaria, fungendo da vettore per la miscela.
Il campione da separare viene applicato sulla fase stazionaria all'inizio del processo cromatografico.
Separazione delle Miscugli mediante Elettroforesi
Anche nell'elettroforesi esistono due fasi, stazionaria e mobile. Si applica un gradiente di potenziale elettrico attraverso la fase stazionaria. Acidi o basi fungono da mezzo della fase mobile per trasportare la miscela. Il campione viene applicato al centro della fase stazionaria; i componenti migrano verso l'elettrodo positivo o negativo a seconda della loro carica.
Applicazioni della Cromatografia
- Analisi farmaceutiche: determina la quantità esatta di sostanze chimiche in farmaci o compresse durante il controllo qualità.
- Controllo ospedaliero: rileva i livelli di alcol nel sangue e monitora altri parametri ematici per garantire trattamenti adeguati.
- Indagini criminalistiche: identifica campioni prelevati sulla scena del crimine; il confronto tra campioni aiuta a risalire al colpevole. Viene anche usata per rilevare impurità nell'acqua (es. cromatografia su carta).
Applicazioni dell'Elettroforesi
- Separazione proteica: tecniche mono- e bidimensionali per proteine e acidi nucleici; l'elettroforesi bidimensionale è fondamentale per il DNA fingerprinting.
- Manipolazione embrionale: introduzione di sostanze chimiche in embrioni di pulcino in crescita.
- Varianti tecniche: elettroforesi su gel, elettroforesi su gel per DNA, ciascuna adatta a specifiche applicazioni.