Salute e malattia

Identificare batteri su frutta: Guida al tampone su agar nutritivo

I batteri sono ovunque e facili da raccogliere e coltivare. Il metodo più comune è in piatti Petri con agar. L'agar contiene nutrienti che permettono a microrganismi (batteri) di crescere in grandi numeri. Questo aiuta scienziati o studenti a visualizzare numero e tipo di colture sulla piastra.

Occorrente

  • Guanti protettivi laboratorio
  • Frutta
  • Piatti Petri parzialmente riempiti di agar
  • Bunsen burner
  • Ago da inoculazione
  • Incubatrice
  • Tabella o libro identificazione batteri
  • Vetrini
  • Acqua distillata
  • Portavetrini
  • Contenitore vasca plastica
  • Colorante violetto cristallo
  • Alcol etilico 95%
  • Microscopio composto

Istruzioni

  1. Indossare guanti protettivi. Prendere ansa da inoculazione e frutto.

  2. Accendere Bunsen burner e passare ansa nella fiamma. Assicurarsi che diventi rossa per uccidere batteri preesistenti.

  3. Strofinare ansa contro il frutto. Aprire subito piatto Petri fresco con agar e strisciare l'ansata sull'agar. Dopo, passare di nuovo ansa sulla fiamma per rimuovere batteri. Chiudere coperchio.

  4. Ripetere per due piastre agar aggiuntive. Servono più piastre per confrontare risultati.

  5. Mettere piastre in incubatrice a 37°C per 48 ore.

  6. Rimuovere piastre e notare numero, colore, forma colonie formate. Consultare tabella/libro identificazione batteri per stabilire tipo colonia.

  7. Passare ansa su fiamma Bunsen, strisciarla su una colonia. Distribuire ansa su vetrino. Aggiungere goccia acqua distillata e far asciugare. Passare brevemente vetrino su fiamma per fissare campione.

  8. Mettere vetrino su portavetrini dentro vasca plastica. Colorare con colorante Gram per un minuto. Il colorante Gram richiede gocce di colorante sul vetrino. La vasca raccoglie colorante in eccesso. La colorazione facilita visualizzazione batteri e determina se Gram-positivi o Gram-negativi.

  9. Lavare vetrino con acqua distillata. Lavare con alcol etilico 95% per rimuovere colore da batteri con pareti sottili. Risciacquare con acqua distillata.

  10. Osservare al microscopio composto. Batteri Gram-positivi: viola scuro, pareti spesse. Gram-negativi: viola chiaro, pareti sottili. Notare forme e numeri.