Salute e malattia
L'acido ribonucleico (RNA) è componente genetico chiave delle cellule, frequentemente estratto e usato da scienziati in esperimenti genetici complessi. Questo processo è isolamento RNA. Un tipo speciale, mRNA, rappresenta 1-5% dell'RNA totale cellulare ed è particolarmente utile. Fin a poco fa non era possibile isolare efficientemente mRNA di organismi procarioti (batteri) per la tecnologia di binding usata. Recenti progressi tecnologici hanno prodotto kit per isolamento ad alto rendimento di mRNA batterico.
Disruzione cellule batteriche e isolamento mRNA. Scegliere metodo più appropriato per disgregare le cellule batteriche da cui isolare mRNA. Il metodo migliore dipende dalle cellule: se dure, macinare finemente il materiale per rompere tutte le pareti cellulari. Metodi sonicazione o agitazione funzionano bene per liquidi o tessuti semisolidi.
Mettere il materiale cellulare disgregato a contatto con soluzione denaturante immediatamente per iniziare degradazione e rimozione materiale genetico. Il tempo è essenziale: DNA e RNA degradano rapidamente. Alcune soluzioni denaturanti funzionano meglio con certi materiali cellulari; alcune specificamente progettate per prevenire degradazione genetica, dando più tempo per isolamento.
Usare il kit isolamento mRNA batterico per isolare mRNA nel campione. Con la maggior parte dei kit è processo semplice, user-friendly; poche ore dopo hai campione mRNA batterico pronto per identificazione o ulteriori esperimenti.
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