Prevenzione emolisi nel prelievo venoso: guida per flebotomisti

Cos'è l'emolisi e perché evitarla

Emolisi = rottura globuli rossi → rilascio emoglobina intracellulare (K⁺, LDH, AST, ALT, bilirubina, ferro) nel siero/plasma. Falsa alterazione risultati: K⁺↑↑ (iperkaliemia spurio), LDH↑, AST↑, bilirubina↑, haptoglobina↓. Campione non processabile → ripetere prelievo (disagio paziente, costo, ritardo diagnosi). Cause principali: tecnica prelievo, manipolazione post-prelievo.

10 Regole d'oro per prevenire emolisi

1. Scelta ago corretto: 21-23 G (farfalla 23-25 G per vene fragili/bambini/anziani). Ago troppo sottile (>23G) = alto stress taglio → emolisi. Ago troppo grosso (<21G) = trauma vena.
2. Selezione sito ottimale: Fossa antecubitale (vena mediana cubitale, cefalica, basilica). Evita: vene dorsali mano (più piccole, dolorose, maggior emolisi), siti distali all'antecubitale, vene sclerotiche/trombotiche/flebite. Tourniquet → palpazione → visualizzazione.
3. Disinfezione e asciugatura: Clorexidina 2% + alcol 70% (o solo alcol 70%) → lasciare asciugare completamente (30 sec). Alcol residuo emolizza globuli rossi al contatto.
4. Tourniquet: tempo MINIMO. Applica → chiedi stringere pugno → punzione → RIMUOVI tourniquet APPENA sangue scorre nel primo tubo (max 1 min). Tourniquet prolungato → stasi → emoconcentrazione + attivazione piastrine/coagulazione + emolisi da stress meccanico.
5. Evita aspirazione violenta (siringa): tirare stantuffo lentamente. Forzare flusso → turbolenza + pressione negativa → emolisi. Preferisci sistema vacutainer (vuoto tubi) per flusso laminare controllato.
6. Ordine tubi (CLSI GP41) - CRITICO:
   1. Colture ematiche (aerobio poi anaerobio)
   2. Tubo citrato sodio (coagulazione) - riempire completamente (rapporto 9:1 sangue:anticoagulante).
   3. Tubo siero (con/senza attivatore coagulo - gel separator)
   4. Tubo eparina (verde - chimica clinica urgente)
   5. Tubo EDTA (lavanda/viola - ematologia)
   6. Tubo fluoruro/ossalato (grigio - glicemia/lattato)
   7. Altri (trace elements, metalli, ecc.)
   Errore ordine → contaminazione crociata anticoagulanti → risultati falsi + emolisi.
7. Riempimento tubi: lasciare riempire per vuoto (non forzare). Tubo citrato: deve riempirsi esattamente al segno (sotto-riempimento = eccesso anticoagulante → alterazione coagulazione + emolisi).
8. Miscelazione delicata (inversione) POST-prelievo:
   • Tubi con attivatore coagulo (siero): 5 inversioni complete → riposo verticale 30 min (coagulazione) → centrifugazione.
   • Tubi anticoagulanti (EDTA, eparina, citrato, fluoruro): 8-10 inversioni delicate immediato (prevenire coaguli/fibrina). Citrato: 3-4 inversioni (alcuni produttori).
   • MAI AGITARE (shake) → emolisi garantita.
9. Centrifugazione corretta: entro 30-60 min (siero: dopo coagulo). Parametri validati per rotore/tubi (es. 1300-1500g × 10 min siero; 2000-3000g × 10-15 min plasma). Evita sovracentrifugazione.
10. Trasporto e conservazione: posizione verticale, temperatura controllata (4-8°C se ritardo), evitare vibrazioni/urti. Catena del freddo per analisi instabili.

Gestione campione emolizzato

Se sospetti emolisi (siero/plasma rosa/rosso): NON processare. Documenta, scarta, ripeti prelievo (dopo aver identificato causa). Comunica a laboratorio per eventuale nota su referto.