Cinetica Enzimatica: Determinazione Energia di Attivazione
Principi
Enzimi = catalizzatori organici che accelerano reazioni metaboliche. Senza enzimi, troppo lente per la vita. Enzimi abbassano energia di attivazione (Ea). Velocità reazione misurata con assay (substrato o prodotto vs tempo a temperatura data). Dati a diverse temperature → calcolo Ea via equazione Arrhenius: ln k = -Ea/RT + ln A.
Materiale
- Dati assay enzimatico
- Carta millimetrata
- Calcolatrice con log naturale (ln)
- Termometro
Procedura
- Tabella dati assay: Velocità aumenta esponenzialmente con temperatura. Unità: (mol/L)/tempo (s).
- Converti temperature in Kelvin: °C + 273 = K (richiesto da Arrhenius).
- Calcola ln(velocità) per ogni temperatura: Calcolatrice: tasto ln (o 2nd+ln).
- Grafico: ln(velocità) asse y vs 1/T (K) asse x. Log naturale linearizza andamento esponenziale.
- Equazione retta y = mx + b: Equivale a ln k = -(Ea/R)(1/T) + ln A. Pendente m = -Ea/R. Costante gas R = 8,314472 J·mol⁻¹·K⁻¹.
- Calcola Ea: Ea = -m × R. Pendente è negativa → Ea valore assoluto (positivo).