Test di Molisch: Principio, Procedura e Interpretazione per Rilevamento Carboidrati
Il test di Molisch è un test qualitativo generale sensibile per carboidrati (mono-, di-, polisaccaridi, glicoproteine).
Principio Chimico
- Disidratazione: H₂SO₄ conc. rimuove H₂O da carboidrato → furfurale (pentosi) o 5-idrossimetilfurfurale (esosi).
- Condensazione: Derivati furfuralici reagiscono con α-naftolo (1% in etanolo) → prodotto ciclico viola/porpora (cromogeno di Molisch) all'interfaccia dei liquidi.
Procedura
- 2 ml soluzione di prova (o sospensione) in tubo di prova pulito.
- Aggiungere 2–3 gocce soluzione α-naftolo; mescolare delicatamente.
- Inclinare tubo; versare lentamente 1–2 ml H₂SO₄ conc. lungo la parete per formare strato inferiore distinto. Non mescolare.
- Osservare l'interfaccia immediatamente.
Interpretazione
- Positivo: Anello viola/porpora alla giunzione entro secondi. Intensità ∝ concentrazione carboidrato.
- Negativo: Nessun cambio colore (o solo giallo/marrone da carbonizzazione).
Sensibilità e Limitazioni
- Rileva ~1–5 µg carboidrato.
- Falsi positivi: Alcuni non-carboidrati (glicerolo, acido lattico, certi aminoacidi) danno colore debole.
- Non distingue tipo carboidrato; seguire con test specifici (Benedict, Barfoed, Seliwanoff, Bial, iodio).
- Pericolo H₂SO₄ conc.: corrosivo, esotermico; usare DPI, aggiungere acido a tubo (non acqua ad acido).
Applicazioni
Screening carboidrati in campioni sconosciuti, analisi alimentari, frazioni biochimiche, estratti vegetali.