Salute e malattia
L'alcol freddo viene utilizzato per separare il DNA da soluzioni a base acquosa, permettendo di purificarlo per successivi test genetici. L'aggiunta di alcol a una soluzione contenente DNA è un metodo semplice per ottenere DNA puro, e le temperature basse rallentano gli enzimi che possono degradare il DNA, migliorando i risultati dell'estrazione.
Le procedure di estrazione per ottenere DNA puro devono eliminare tutti i componenti molecolari e chimici del tessuto da cui si estrae il DNA. I primi passaggi prevedono la lisi o distruzione delle pareti cellulari. Questo può essere fatto con vari agenti chimici caustici per le membrane cellulari ma innocui per il DNA. Le cellule possono anche essere sonicate, omogeneizzate o macinate per distruggere le membrane.
Una volta distrutte le pareti cellulari, si aggiunge un detergente per eliminare grassi e oli che compongono le membrane cellulari. I detergenti fanno sciogliere grassi e oli nella soluzione.
Proteine ed enzimi possono essere digeriti aggiungendo una proteasi alla soluzione. Le proteasi scompongono le proteine in piccoli peptidi e acidi amino.
L'aggiunta di alcol freddo a una soluzione fa precipitare e aggregare il DNA. Il DNA può essere raccolto centrifugando il campione e rimuovendo lo strato liquido. Il DNA dovrebbe esistere come un piccolo pellet sul fondo della provetta da centrifuga.
Il DNA può essere lavato risospendendolo in una soluzione di alcol freddo e centrifugandolo nuovamente più volte per ottenere un campione di DNA molto puro. Gli alcoli tipicamente usati per precipitare il DNA includono etanolo e isopropanolo. Questo processo lascia un campione molto puro per test genetici rigorosi.
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