Elettroforesi in Genetica: Tecniche e Applicazioni

L'elettroforesi è un metodo di prova in biologia molecolare per separare sostanze come proteine al fine di studiarne la struttura molecolare. L'analisi si fa misurando la velocità di migrazione delle proteine attraverso un gel sotto l'influenza di un campo elettrico. Proteine a basso peso molecolare migrano più velocemente, quelle a peso maggiore più lentamente. Esistono diversi tipi: elettroforesi di DNA, RNA e proteine. Tutte utili nello studio della genetica.

Elettroforesi del DNA

Il DNA è caricato negativamente per il dorso fosfato della struttura a doppio filamento. Il potenziale elettrico spinge verso il polo positivo per la carica negativa. La velocità di migrazione verso il polo positivo è rallentata dal gel di agarosio che contiene il DNA. Molecole più grandi migrano più lentamente, quelle più piccole più velocemente. I gel sono visualizzati sotto transilluminazione colorando il DNA con colorante fluorescente, solitamente bromuro di etidio.

Elettroforesi dell'RNA

L'RNA è simile al DNA eccetto che lo zucchero del backbone è ribosio invece di desossiribosio. Si usano gel denaturanti perché l'RNA tende a ripiegarsi su se stesso formando strutture secondarie stabili che impediscono la migrazione per dimensioni come nel DNA. Includere un controllo positivo di RNA previene risultati distorti o aiuta a determinare se c'è problema con il campione o il gel. Marcatori di RNA possono essere usati se il peso molecolare è noto. La procedura è simile a quella del DNA.

Elettroforesi delle Proteine

L'elettroforesi delle proteine è un test che misura diverse proteine nel sangue. Le basi sono gli aminoacidi. Le proteine hanno strutture diverse. Il sangue è prelevato da una vena con ago collegato a provetta. Il sangue viene portato in lab e preparato su gel di agarosio con lo stesso metodo del DNA. Proteine del sangue, inclusi albumina e diversi tipi di globuline, sono identificate per peso molecolare. Migrano secondo dimensioni: più grande = più lento; più piccola = più lontano sul gel. L'identificazione delle proteine sieriche è utile per il matching dei gruppi sanguigni.