Laboratorio di Microbiologia: Coltura e Conteggio Batteri - Guida Completa

Cose che Serviranno

• Campione batterico
• Piastre di Petri con terreni di coltura
• Flacone con terreno di coltura
• Anse di inoculazione
• Calcolatrice
• Dispositivi di protezione individuale
• Cappa a rischio biologico

Istruzioni

Inoculazione

1. Passo 1: Striscia la piastra di Petri con il tampone del campione da un lato all'altro su metà della piastra. Se il campione è urina, prendi una goccia di urina e usa un'ansa inoculatrice per strisciare la piastra di Petri da un lato all'altro su metà della piastra. Se il campione è sangue, metti il sangue nel flacone con terreno.
2. Passo 2: Usa un'ansa inoculatrice diversa per strisciare la seconda metà della piastra di Petri da un lato all'altro, partendo dalla metà che è stata inizialmente inoculata. Questo porta i batteri inizialmente posti sulla piastra e ne porta un piccolo numero sull'altra metà.
3. Passo 3: Metti le piastre di Petri inoculate o i flaconi con terreno nell'incubatore a 37 gradi Celsius per il tempo specificato nella procedura operativa standard del tuo laboratorio.

Conteggio Colonie

4. Passo 4: Togli le piastre di Petri dall'incubatore e mettile sotto una cappa a rischio biologico. Se il campione era sangue, togli i flaconi dall'incubatore e striscia piastre di Petri in modo simile agli altri campioni e incuba quelle piastre.
5. Passo 5: Conta il numero di colonie individuali che crescono sulla piastra. Se la tua inoculazione è stata fatta correttamente, le colonie dovrebbero essere abbastanza distanti l'una dall'altra per essere contate individualmente. Se le colonie si sovrappongono, potresti dover reinoculare nuove piastre.
6. Passo 6: Usa una calcolatrice per moltiplicare il numero di colonie che hai contato per il volume del campione (nel caso di campioni liquidi). Questo ti darà il numero di unità formanti colonia (UFC) per millilitro di campione, noto come conta UFC. Se il campione non era liquido, allora solo il numero di UFC da solo è rilevante.