Identificazione della Salmonella: tecniche sierologiche e classificazione

Introduzione

Salmonella è un genere di batteri; alcuni sierotipi causano tossinfezioni. Classificazione complessa: sistemi di nomenclatura diversi usati in passato. In generale, classificate in 2 specie, suddivise in sottospecie e sierotipi (sierovari). Le tecniche sierologiche sono chiave per la classificazione.

Principio sierologico

Gli anticorpi (proteine a Y) sono prodotti dal sistema immunitario per legare bersagli molto specifici (antigeni). Un anticorpo lega tipicamente un solo antigene. Questa specificità permette di differenziare ceppi dello stesso genere/specie. I metodi per sierotipare = tecniche sierologiche.

Principali tecniche

Agglutinazione su vetrino (Slide Agglutination)

Test più semplice. Goccia di batteri in salina in due punti su vetrino. Anticorpi per antigene specifico aggiunti a uno solo. Se antigene presente → anticorpi legano (ogni anticorpo lega 2 antigeni) → reticolazione → grumi visibili a occhio nudo. Se assente → nessun cambiamento visibile.

Agglutinazione in tubetto (Tube Agglutination)

Simile, ma in provetta/i. Anticorpi anti-flagelli (code batteriche) → agglutinazione caratteristica: grumi lenti, scuotibili.

ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)

Potente per identificazione rapida da campione sconosciuto. Tecnica comune: double antibody sandwich assay.

1. Anticorpi per antigene noto fissati su pozzetti di piastra multi-pozzetto.
2. Aggiungere antigene sconosciuto → lavaggio per rimuovere non legato.
3. Se antigene corrisponde, resta legato.
4. Aggiungere secondi anticorpi (con enzima coniugato). Se antigene presente, legano.
5. Aggiungere substrato cromogeno. Se enzima presente → cambio colore = antigene presente.

Sierotipi e sierogruppi

• Oltre 2.500 sierotipi di Salmonella (aggiornato).
• Classificati per antigeni O (parete cellulare) e H (flagello).
• Designazione: O-#, H-#. Nomi comuni: Typhi (febbre tifoide), Typhimurium (tossinfezione).
• Sierogruppi: raggruppamento per antigeni O. Es.: O:2 = Gruppo A; O:6,7 = Gruppo C.

Equivoci nomenclaturali

Nome completo: Genere specie sottospecie sierotipo (es. Salmonella enterica enterica sierotipo Typhimurium). Spesso abbreviato come nome di specie (es. Salmonella typhimurium) → confusione. Meglio specificare: Salmonella sierotipo Typhimurium.