Test DFA (Anticorpo Fluorescente Diretto) per la Peste: Metodo Diagnostico Rapido
Test DFA per il Rilevamento di Yersinia pestis
Il test DFA (Direct Fluorescent Antibody) è il metodo diagnostico presuntivo più rapido per la peste, fornendo risultati entro 1–2 ore dal ricevimento del campione.
Principio
- Anticorpi monoclonali marcati con fluoresceina specifici per l'antigene Fraction 1 (F1) di Y. pestis.
- Applicati su strisci da:
- Aspirato linfonodale (bubbone)
- Espettorato / lavaggio bronchiale (peste polmonare)
- Isolato da emocoltura
- Tessuti da animali deceduti (roditori, ecc.)
- Incubazione, lavaggio, montaggio; esame al microscopio a fluorescenza (fluorescenza verde mela nei coccobacilli).
Caratteristiche Prestazionali
- Sensibilità: 80–95% (dipendente dal campione).
- Specificità: >95% con anticorpi F1-specifici.
- Tempo di esecuzione: <1 ora per preparazione striscio + colorazione.
- Limiti: Non distingue organismi vitali da morti; non determina sensibilità antimicrobica.
Algoritmo Diagnostico (CDC/OMS)
- Presuntivo: DFA positivo + compatibilità clinico/epidemiologica → iniziare trattamento + notifica sanità pubblica.
- Confermativo: Coltura (48–72h), PCR (gene F1, gene pla), sierologia (acuta/convalescente).
- Conferma Laboratorio di Riferimento: Richiesta per classificazione definitiva del caso.
Gestione del Campione
- Trasporto a 4°C (catena del freddo); non congelare.
- Processare in BSL-2 con pratiche BSL-3; Y. pestis è agente select Tier 1.
- Notificare subito il laboratorio per elaborazione prioritaria.
Contesto Clinico
- Aree endemiche: USA sudoccidentale (AZ, CO, NM, UT), Africa, Asia, Sud America.
- Fattori di rischio: esposizione roditori, punture pulci, manipolazione animali malati, viaggi.
- Terapia empirica (streptomicina, gentamicina, doxiciclina, ciprofloxacina) non deve attendere risultato DFA se sospetto clinico alto.
Il DFA consente risposta rapida di sanità pubblica — isolamento, contact tracing, indagine ambientale — mentre procedono i test confermativi.