Qual è lo scopo di Acid colorazione veloce?

In microbiologia, macchiando un batterio significa per colorarlo con un colorante per vedere più chiaramente al microscopio. Se i batteri non sono macchiati, appaiono limpida e incolore, ed è difficile vedere le loro forme. A parte le loro forme, come facilmente un batterio è tinto da alcune macchie - se non del tutto - spesso fornisce un indizio per identificare i batteri. Colorazione acido-resistente è un tipo di colorazione che è efficace su alcuni batteri che non possono essere colorati con altri metodi. Differenziale colorazione

a macchia di una normale batteri, liquido macchia è applicata alla diapositiva per circa un minuto, poi risciacquato con acqua. Colorazione differenziale utilizza macchie diverse per due batteri diversi nella stessa diapositiva. Ad esempio, in una colorazione di Gram, il vetrino viene prima trattata con violetto cristallo e iodio, poi decolorato con alcool. Cellule che sono Gram-positivi manterrà il colore viola scuro della prima macchia anche dopo viene usato l'alcool, mentre le cellule Gram-negativi torneranno incolore. Poi una seconda macchia è applicata, in un colore contrastante come il rosa, e le cellule Gram-negative si tingono di rosa, mentre le cellule Gram-positivi terranno la loro originaria macchia.
Storia

Alcuni batteri hanno pareti cellulari spesse composte da lipidi, i mattoni di grassi, che li rende cerosa e quasi impermeabile. Ciò significa una normale macchia non può penetrare nella cellula. Nel 1880, gli scienziati hanno cercato di studiare il Mycobacterium tuberculosis, il batterio che provoca la tubercolosi. Tuttavia, non terrebbe una regolare Gram stain se non è stato immerso nella macchia fino a 24 ore. Paul Ehrlich, che in seguito ha sviluppato il primo farmaco efficace contro la sifilide, sviluppato colorazione acido-resistente per forzare la macchia nei batteri. Metodo di Ehrlich sono voluti solo 45 minuti, mentre la tecnica di colorazione acido-resistente moderna richiede solo 5 minuti.
Metodo

Per forzare il colorante, solitamente carbol-fucsina , in un batterio, va riscaldato sopra un becher di acqua bollente per 5 minuti, mentre la slitta è costantemente invaso da macchia e non lasciati asciugare. Un metodo alternativo di calore è quello di utilizzare modificato Kinyoun carbolfucsina macchia, che non ha bisogno di essere riscaldata, ma è imperativo che la diapositiva non si secchi durante i 5 minuti di immersione nella macchia. Qualunque sia il metodo di colorazione primaria viene utilizzata, il vetrino viene decolorato con alcool acido - alcool non regolari - e tinto con un colorante di contrasto secondario di un colore diverso per mostrare gli altri batteri che possono essere presenti. Batteri cui macchie primaria rimangono dopo la decolorazione con alcool acido sono chiamati acido-resistenti.
Organismo precauzione

Mycobacterium tuberculosis è estremamente pericoloso, e viene esaminato solo in ospedali e cliniche strutture che dispongono di camere separate o cappucci di trasferimento appositamente progettati per evitare contaminazioni. E 'illegale usare in un laboratorio scolastico. Invece, Mycobacterium smegmatis viene utilizzato, ma ha una parete cellulare molto più sottile di M. tuberculosis, quindi è più facile accidentalmente-decolorare il vetrino e rimuovere la colorazione primaria.
Procedurale precauzione

fumi Carbol-fucsina sono tossici, in modo che quando il riscaldamento di loro, usare una cappa aspirante per contenere i fumi e sfogare la loro fuori. Inoltre, per evitare i pericoli di diapositive di riscaldamento del tutto, Kinyoun carbolfucsina può essere utilizzato, invece, che ha una maggiore concentrazione di principi attivi, due fenolo e fucsina nella macchia, e non ha bisogno di essere riscaldate per penetrare i batteri.