Tecniche Separazione Medica: Centrifugazione, Cromatografia, Elettroforesi e Altre

I laboratori clinici si affidano a metodi separazione fisico-chimici per isolare analiti per diagnosi, monitoraggio, ricerca. Sette tecniche fondamentali:

1. Centrifugazione

Separa particelle per densità via forza centrifuga. Uso clinico: Frazionamento sangue (GR, buffy coat, plasma/siero), preparato sedimento urine, conta cellule LCR.

2. Cromatografia

Partizionamento differenziale tra fase mobile e stazionaria.

• HPLC/UPLC: Monitoraggio farmaci, dosaggi ormonali, livelli vitamine.
• GC-MS: Tossicologia, screening disordini metabolici (acidi organici).
• TLC/Carta: Didattica, separazioni qualitative semplici.

3. Elettroforesi

Separa molecole cariche (proteine, acidi nucleici) per dimensione/carica in campo elettrico.

• Elettroforesi su Gel: Frazioni proteine (varianti emoglobina, immunoglobuline), analisi DNA/RNA.
• Elettroforesi Capillare: Screening ad alta risoluzione emoglobinopatie, quantificazione proteine.

4. Precipitazione

Converte analiti solubili in forme insolubili via aggiunta reagente.

• Proteine urinarie (acido sulfosalicilico), chetoni (nitroprussiato), bilirubina (Fouchet).
• Biochimica: Purificazione proteine (solfato ammonio).

5. Dialisi

Diffusione attraverso membrana semipermeabile lungo gradiente concentrazione.

• Clinica: Emodialisi (terapia sostitutiva renale).
• Lab: Scambio buffer, rimozione piccole molecole da campioni proteici.

6. Filtrazione

Separazione basata su dimensioni via mezzi porosi.

• Sterilizzazione (0,22 µm), chiarificazione campioni, microbiologia (filtrazione membrana per conta UFC).

7. Distillazione

Separazione cambiamento fase per differenze punto ebollizione.

• Purificazione acqua per preparazione reagenti, recupero solventi, produzione farmaceutica.

Ogni tecnica sfrutta distinta proprietà fisica – densità, polarità, carica, solubilità, dimensione, volatilità – abilitando isolamento preciso analiti per diagnostica moderna.