Paraffina Protocollo

Gli scienziati di solito bisogno di solidificare campioni biologici per la sezione fuori. Questo rende più facile per gli scienziati per aggiungere coloranti , anticorpi e sonde per il campione biologico . Si riduce anche la sovrapposizione dei vari strati di cellule . Gli scienziati usano paraffina come matrice dura per il taglio , in quanto la paraffina non si mescola con l'acqua . La paraffina è un tipo di idrocarburo . I campioni biologici contengono acqua , così gli scienziati devono disidratare i campioni utilizzando bagni di etanolo sempre più concentrati. Xilene

Scienziati rimuovere l'etanolo mediante xilene . Poi usano paraffina fusa per rimuovere lo xilene . Per la microscopia ottica , le sezioni di paraffina sono di solito di spessore di cinque micron . Cera di paraffina non è già abbastanza difficile per le fette sottili . Gli scienziati reidratare il tessuto utilizzando xilene , quindi etanolo . Poi sciacquare il campione biologico con acqua distillata per evitare la contaminazione .
Fissaggio

tessuti inclusi in paraffina sono di solito fissati con formalina tamponata neutra , che è la versione commerciale di formaldeide . Questo include paraformaldeide e metanolo , che impedisce la formaldeide da conversione in acido formico . Tessuti fette sottili bisogno 48 ore dalla fissazione a temperatura ambiente per istologia ottimale , che è lo studio dell'anatomia microscopica . In caso contrario , il tessuto si indurisce e diventa fragile . Prima della trasformazione, il tessuto è di solito memorizzato nel 70 per cento di etanolo ad una temperatura di 4 gradi centigradi.

Paraffina Processori

scienziati spesso utilizzano processori paraffina per inviare il tessuto tramite delle vasche che disidratano progressivamente il materiale prima di paraffina calda può entrare attraverso i tessuti . Gli scienziati corrono il processore durante la notte . Il processore riscalda solo il tessuto per un certo periodo di tempo dipendente dal tessuto per renderlo non diventa duro e fragile . Il processore utilizza un vuoto che accelera la permeazione di paraffina e rimuove le bolle di aria . Una volta elaborati , i tessuti vengono conservati in cassette a temperatura ambiente .
Cera di fusione

La paraffina si scioglie per un'ora prima di aggiungere il tessuto . L' intera cassetta viene posto in un bagno di paraffina 65 gradi Celsius per 15 minuti. Un dissipatore di calore in alluminio freddo raffredda la cera di paraffina per 20 minuti . Quando le fessure di cera oi tessuti non sono allineati correttamente , lo scienziato si scioglie la paraffina e ripete il processo .
Taglio

Quando sezionamento dei tessuti, lo scienziato diventa bagnomaria a 35 a 37 gradi Celsius . L'acqua è fresca e deionizzata. I blocchi sono collocati a faccia in giù su un blocco di ghiaccio o dissipatore di calore per 10 minuti . Una lama taglia il blocco in sezioni. Due problemi che possono verificarsi sono poveri cordonatura e campioni frammentando . Quando il frammento esemplari , l'acqua è troppo calda . Se il blocco non Ribbon bene , si dovrebbe mettere di nuovo sul blocco di ghiaccio e rassodare la cera prima di ricominciare.