Determinazione Sesso da Feci: Feasibilità Analisi DNA e Applicazioni
Sì. Un campione fecale contiene cellule epiteliali intestinali desquamate (e leucociti) che portano DNA nucleare. Il sesso può essere determinato mediante amplificazione PCR di marcatori cromosomi sessuali.
Metodologia
- Raccolta campione: Feci fresche (evitare contaminazione urine) in contenitore sterile.
- Estrazione DNA: Kit commerciali (es. QIAamp Fast DNA Stool Mini Kit) ottimizzati per basso DNA umano / alto background batterico.
- Loci bersaglio:
- AMELX / AMELY (amelogenina) – differenza dimensione (X: 106 bp, Y: 112 bp).
- SRY (regione determinante sesso Y) – specifico maschio.
- DYS / DXS marcatori STR (pannelli forensi).
- Amplificazione: PCR multiplex (es. PowerPlex, GlobalFiler).
- Rilevazione: Elettroforesi capillare → chiamate alleli.
Applicazioni
- Forense: Identificazione autore da prove fecali su scene crimine.
- Ricerca NIPT (test prenatale non invasivo): DNA fetale in feci materne (sperimentale).
- Biologia fauna selvatica: Determinazione sesso specie elusive (orsi, primati) da scat.
- Archeologia: Paleofeci (coproliti) → demografia popolazioni antiche.
- Clinico (raro): Monitoraggio chimerismo post-trapianto; rilevazione SRY in riceventi femmine di cellule donatore maschio.
Sfide
- Bassa resa DNA umano (0,01–1% DNA totale).
- Inibitori PCR (sali biliari, polisaccaridi, eme) – richiedono polimerasi resistenti inibitori / diluizione.
- Degradazione (ambientale, tempo).
- Contaminazione (DNA manipolatore, cross-campione).
Affidabilità
Con estrazione ottimizzata e kit forensi validati, accuratezza >99%. Non test clinico standard — disponibile in laboratori forensi/di riferimento.