Western Blot Metodi di rilevamento

Poiché il numero di casi di HIV e AIDS è aumentato in tutto il mondo , la necessità di test accurati HIV è diventato essenziale. Ora, dopo positivi test ELISA HIV , i medici utilizzano un test Western Blot per confermare una infezione da HIV positivo . I medici diagnosticano la malattia di Lyme attraverso test Western Blot pure. Il test utilizza metodi di rilevamento intricati : operatori sanitari devono trasferire campioni di sangue da un gel a una membrana per facilitare il processo di rilevamento . Per effettivamente identificare gli anticorpi nella membrana , i lavoratori utilizzano enzimi specifici , substrati e /o flurophores . AP Enzyme

fosfatasi alcalina ( AP) costituisce uno degli enzimi primari nei test Western Blot . AP ha un tempo di reazione lineare , che gli conferisce un vantaggio rilevamento su altri enzimi . Più tempo una reazione AP deve avvenire , più accurato il test . Tuttavia, il periodo più lungo può raccogliere altri composti chimici e di rumore " di fondo ", che può falsare i risultati del test .

HRP enzimatici

Operai medici ritengono rafano perossidasi ( HRP ) superiore a AP , a causa di dimensioni più piccole di HRP , alto tasso di attività , la compatibilità con la membrana di reazione , affidabilità , prezzo poco costoso e ampia disponibilità .

Cromogenico Substrati

professionisti medici ritengono substrati cromogeni migliore per la visualizzazione della reazione interna membrana del sangue e degli enzimi . Substrati cromogeni non sono sensibili come altri substrati e tendono a scomparire come la macchia si asciuga . Ma per una conferma rapida prova visiva , substrati cromogeni fare una scelta efficace .
Chemiluminescenti Blotting Substrati

chemiluminescenti substrati assorbente richiedono una reazione costante per un test di successo . Se l'enzima cessa l'attività o il substrato è esaurita , il risultato della prova diventa perso . Tuttavia , in un test ottimale , il risultato della prova sarà disponibile in uno a 24 ore . Operai medici utilizzano apparecchiature di imaging digitale o raggi X per vedere effettivamente il risultato del test , perché l'occhio nudo non può rilevarla.
Flurophores

Se i lavoratori medici non prova con enzimi e loro rispettivi substrati , allora essi utilizzano anticorpi flurophore - coniugato . Il test flurophore richiede meno passaggi , ma ha bisogno di attrezzature speciali . Il test richiede una sorgente di luce di eccitazione , che provoca la reazione adeguata nella membrana . Flurophores e apparecchi di illuminazione sono costosi , ma operatori sanitari hanno il vantaggio di utilizzare più flurophores nello stesso esperimento .