Procedura per il test ELISA

ELISA è l'acronimo di una procedura di prova forense chiamato enzyme- linked test immunoabsorbent . Esso si basa sulla elevata specificità degli anticorpi per un antigene specifico . I ricercatori usano anticorpi chimicamente modificati ancorate ad un pozzetto e antigeni colore targhetta per determinare la presenza e la concentrazione di una grande varietà di composti , farmaci e agenti patogeni . I campioni possono essere prelevati da sangue , urine , saliva e altre fonti . Anticorpi e antigeni

ELISA normalmente utilizza diversi componenti chimicamente ingegnerizzati per generare un test per un determinato antigene . Il primo passo nella produzione di un test ELISA è quello di sviluppare un anticorpo per il composto da testare . L'anticorpo viene quindi purificato , modificato , e ancorati o immobilizzato su un pozzetto che verrà utilizzato per eseguire il test . Il composto in fase di test per avrà un tag fluorescente aggiunto

industria utilizza una piastra rettangolare standard "pozzi campione" - . Come piccole ciotole o provette stampati all'interno di eseguire più esperimenti. Dimensioni piastra sono 127,8 millimetri per 85,5 millimetri e standardizzati in modo da adattarsi strumenti analitici provenienti da una varietà di produttori . Piatti tipici sono tra i pozzi di sei e 96 campioni , con i modelli più recenti hanno centinaia o più .
Il test

Quando una soluzione contenente il composto si sta testando e l' composto di colore -tagged sono messi in pozzetto , competono per il legame sul anticorpo immobilizzato . Il composto più nativo , il composto colore targhetta meno sarà in grado di legarsi all'anticorpo immobilizzato . Il campione è ben sciacquato del composto non associato ( nativo e colorato) . Il pozzo campione è valutato per quanto compound colore - tagged rimane , di solito con uno spettrofotometro .
I risultati

Meno colore significa una maggiore concentrazione della composto nativo. Ricercatori istituito un "curva standard" in una serie di pozzi a cui si aggiungeranno una serie di concentrazioni note del composto nativo. Il test ELISA viene eseguita su tutti i pozzetti e la quantità di differenza di colore lungo tutto l'arco degli standard permette ai ricercatori di confrontare e determinare concentrazioni sconosciute nei campioni che stanno valutando .

Test ELISA sono usati per testare una vasta gamma di cose da virus HIV ai farmaci , veleni e altre sostanze chimiche . Essi hanno il vantaggio di alta produttività per un gran numero di campioni e durante l'esecuzione di molti campioni possono essere molto conveniente .

Il test ELISA può essere utilizzato anche per rilevare anticorpi in una soluzione campione . In questo caso l'antigene ( porzione del composto di interesse che si lega all'anticorpo ) è immobilizzato sul campione, e anticorpi per la prova di avere un tag colore attaccato .